产品货号:
GS0150
中文名称:
miRNA第一链cDNA合成试剂盒(加尾法)
英文名称:
miRNA First Strand cDNA Synthesis(Tailing Reaction)
产品规格:
10T|20T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒包括miRNA第一链cDNA合成的全部试剂。miRNA第一链cDNA合成采用Poly(A)加尾反应和cDNA合成反应同步进行的方法,仅需60分钟即可获得所有miRNA的cDNA产物。获得的cDNA产物进行50倍稀释后可直接用于后续的Real Time PCR实验。试剂盒中还提供人、大鼠、小鼠通用的U6内参的上游引物,配合本试剂盒的通用下游引物(Universal PCR Primer R)使用,可在宽广的区域内得到良好的标准曲线。
- Poly(A)加尾反应和cDNA合成反应同步进行,操作简单、快速。
- 从一个反应合成的cDNA可同时检测多种miRNA。
- 提供U6内参引物,轻松获得良好的标准曲线。
- 2×浓缩的预混溶液和预混酶使用更方便。
组分 | 10T | 20T |
2×miRNA P-RT Solution mix | 100μL | 200μL |
miRNA P-RT Enzyme mix | 20μL | 40μL |
RNase-free water | 1mL | 2mL |
Universal PCR Primer R(10μM) | 100μL | 200μL |
Universal U6 Primer F(10μM) | 100μL | 200μL |
保存:-20℃,避光。
- 所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
- 避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。长期保存可置于-20℃。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
- 使用过程中应避免RNase污染。
- 反应液配制请在冰上进行。
- Poly(A)加尾反应和反转录反应
- 在冰浴的离心管中加入如下反应混合物:
成分 用量 2×miRNA P-RT Solution mix 10μL miRNA P-RT Enzyme mix 2μL Total RNA/micro RNA 2μg/100ng RNase-free water 至20μL - 轻轻混匀后离心3~5 s,反应混合物37℃温浴60min,然后85℃加热5min使酶失活,4℃保存。
- 建议将获得的cDNA反应液稀释50倍后再作为模板进行荧光定量检测。
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